夫妻分居证明可以由单位或居委会、村委会开具。

《婚姻法》第三十二条规定，男女一方要求离婚的，可由有关部门进行调解或直接向人民法院提出离婚诉讼。人民法院审理离婚案件，应当进行调解；如感情确已破裂，调解无效，应准予离婚。因感情不和分居满二年的，调解无效的，应准予离婚。